中药预处理对动物模型HIRI的防护作用

【关键词】  缺血

     肝脏的缺血再灌注损伤(Ischemia Reperfusion Injury，IRI）是导致肝叶切除、肝移植术后器官功能障碍和衰竭的重要因素［1］，为肝脏外科尚未完全解决的棘手问题。因此，如何在有效控制入肝血流、减少术中出血的同时，提高肝脏对缺血的耐受性，减轻肝脏的缺血再灌注损伤，是肝脏外科研究的中心内容。目前，针对肝脏缺血再灌注损伤（Hepatic Ischemia Reperfusion Injury， HIRI）这一问题，可采取缺血预处理、间歇血流阻断和药物预处理等措施加以防护，其中药物预处理是利用某些活性物质直接或间接的药理作用来达到类似缺血预处理的保护作用［2］。现就中药预处理对动物模型HIRI的防护作用研究作一综述。

    1  缺血再灌注损伤的发生机制［3］

    IRI是一个多因素参与的病理生理过程，发病机制主要与以下因素相关。

    1. 1  代谢性酸中毒

    肝缺血后， 肝脏细胞供氧不足，无氧糖酵解增加，导致代谢性酸中毒。再灌注后，代谢性酸中毒被迅速纠正，增强了pH依赖性酶类，如磷脂酶、蛋白水解酶等的活性，促进了细胞的死亡，这种现象称为pH反常。

    1. 2  氧自由基的产生

    再灌注时主要通过黄嘌呤氧化酶系统、吞噬细胞系统和线粒体呼吸链系统三条途径激发氧自由基。氧自由基一方面可直接损伤肝细胞膜，导致细胞的破坏;同时又可损伤内皮细胞，引起微循环完整性的丧失和血流的减少，是缺血再灌注损伤的主要原因。

    1. 3  钙超载

    钙超载引起肝损伤的机理是：细胞内高浓度Ca2+可促使黄嘌呤脱氢酶向黄嘌呤氧化酶转化，从而为氧自由基的产生提供了催化剂；枯否细胞(Kupffer cell， KC)的钙超载是其被激活的根本原因，激活的KC可通过释放大量毒性介质参与或介导肝脏损伤。此外内皮细胞的钙超载可导致肝内微循环阻抗增大，使再灌注微循环血流量降低。

    1. 4  无流现象

    缺血再灌注可引起肝窦内皮细胞的凋亡、坏死， 从而导致许多肝脏微循环区域血流的完全停止。

    2  中药在HIRI防治方面的优势

    随着近年来生物化学、分子生物学的，肝脏缺血再灌注的生化过程及分子机制逐渐明确，众多学者针对缺血再灌注损伤的发病机制，提出诸多防止和减轻HIRI的方法和措施，譬如缩短热缺血时间、缺血预处理、药物预处理，在此只说药物预处理。对HIRI具有预处理效果的药物主要有钙通道阻滞剂、自由基清除剂、抗细胞凋亡剂以及具有改善微循环或细胞能量代谢等药物［4］。然而，其中许多药物具有较大的毒副作用，因此，诸多中药制剂成为热点，其优势可用“广、小、多”三个字概括即安全范围广、毒副作用小、作用靶点多。丹参能防止HIRI时肝细胞内钙超载，具有减轻氧自由基(oxygen free radicals，OFR)和脂质过氧化损伤；阻断FAS和穿孔素的交叉作用途径；稳定细胞膜、细胞器膜的完整性等功能，这些功能能明显减轻对再灌注后肝细胞的损害，充分体现其多靶点的优势。

    3  相关中药对HIRI的防护作用

    3.1  活血化瘀药

    3.1.1  丹参及复方丹参

    医学研究表明，丹参具有改善微循环、抗OFR等作用。卢绮平等［5］研究发现， 3种不同浓度的丹参均有阻止跨膜内流作用，且在低浓度组即可体现， 并较“异博停”作用显著。因此认为丹参可能是作为一种选择性作用“受体操纵性Ca2+通道”药物在HIRI中发挥重要作用。可见，丹参作为钙通道调节剂和OFR清除剂对HIRI能起到保护作用。

    王茂林等［6］通过大鼠模型观察肝组织中丙二醛（malondialdehyde ，MDA）含量和血清中丙氨酸转氨基转移酶（alanine amiotransferase，ALT，旧称谷-丙转氨酶即GPT）的变化以及两者变化的相关关系。结果显示， 肝缺血再灌注时肝组织中MDA的含量及血清中ALT含量均显著增高，且两者成正相关，丹参能显著降低肝组织MDA的含量及血清中的ALT、总胆红素(total bilirubin， TB)含量，表明OFR参与了HIRI。

    张文海等［7］研究了复方丹参对大鼠肝细胞线粒体再灌注损伤的影响，结果显示应用复方丹参使复流后2～6h肝细胞和复流6h肝细胞线粒体的MDA的浓度显著降低。通过分析可知，丹参作为复方丹参的主要成分，其能作为自由基清除剂增加内源性超氧化物歧化酶（Super Oxide Dismutase，SOD）的活性，可有效抑制肝细胞的脂质过氧化反应，阻滞血钙的胞内转移［8］，且能有效改善肝脏的微循环。该实验结果还提示复方丹参通过抑制脂质过氧化反应保护线粒体的结构和功能，维持肝细胞的能量代谢，从而在一定程度上减轻肝脏的再灌注损伤。

    3.1.2  川芎嗪和阿魏酸钠

    川芎嗪是中药川芎中分离提纯的一种生物碱单体四甲基吡嗪。 ［9，10］采用大鼠模型， 观察发现川芎嗪可显著减少血清转氨酶（AST和ALT）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase ，LDH）的溢出，减轻HIRI后肝细胞病理性损伤；明显降低肝组织脂质过氧化物、血栓素B2（TXB2），维持缺血及再灌注期SOD活性，提示TXB2、PGI2（前列环素）使微循环调节因子的代谢失衡是参与HIRI发生的重要因素之一， 川芎嗪可对抗TXB2的合成与活性， 从而减轻对肝脏的IRI。林丽娜等［11］用家兔HIRI模型， 同样观察到川芎嗪对HIRI时LDH活性的异常改变有明显的保护作用。

    王万铁等［12］利用家兔急性肝缺血模型观察了3组家兔存活率和肝血流在阻断前及开放后各时相点的血清GPT、GOT［门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase， AST）的旧称］和MDA的水平变化，结果显示，川芎组家兔存活率显著高于对照组和盐水组，后两组无显著差异，而血GPT、GOT在阻断及再开放后虽显著增高，但均明显低于对照组，川芎组MDA水平明显低于对照组，且肝细胞诸多病理损害程度较对照组均明显减轻。这些结果有力证明了川芎嗪有保护肝细胞功能的作用。早有研究表明，川芎嗪不仅是OFR清除剂，而且也是一种见效快、疗效好的钙通道阻滞剂。由此我们可以初步认识到，川芎嗪对急性缺血性肝损害的作用机制可能是，通过抑制脂质过氧化物的形成和Ca2+大量内流而打破OFR介导的细胞损害之恶性循环，从而保护了细胞膜结构和功能的完整性，延缓急性缺血性肝损伤的发生。

    另一实验证实，川芎嗪能提高机体内源性SOD活性，同时可清除OFR，进而降低组织脂质过氧化程度，并且在肝脏缺血再灌注一定时间后加用川芎嗪后，能使本已降低的三磷酸腺苷(ATP)、总腺苷量（TAN）和肝脏的细胞能荷（EC）均明显高于模型组，肝细胞形态学异常也明显减轻，表明川芎嗪可通过增加肝细胞能量而减轻HIRI。

    王万铁等［13，14］采用家兔HIRI模型进行研究， 结果观察到随着肝缺血再灌注时间的延长， 肝组织浸润程度逐渐加重， 肝细胞形态学异常变化显著， 川芎嗪在明显减轻上述异常变化的同时，可明显减轻HIRI时血小板最大聚集率、聚集坡斜率、最大聚集时间的异常变化。提示川芎嗪可通过抑制血小板聚集、粘附、活化而减轻HIRI。

    阿魏酸钠（Sodium ferulate，SF）是阿魏酸的钠盐，是桂皮酸的衍生物之一，中药川芎、当归、升麻等多种中药都含有阿魏酸。具有抗炎、抑制血小板凝集、抑制血栓合成酶活性和抗自由基等作用［15］ 。贺德等［16］发现SF对HIRI有明显保护作用，而这种作用主要是通过对抗OFR来实现的，同时发现SF保护组再灌注2 h后，其肝脏的结构和生化指标均不能达到肝缺血前水平。贺德［17］研究结果显示阿魏酸钠清除OFR的作用逊色于SOD， 但两者对大鼠肝缺血再灌注所致肝细胞的结构和功能损伤的保护作用基本相同。

    3.1.3  三七总皂甙

    三七总皂甙（Panax notoginseng saponins，PNS）是从中药三七中提取的活性有效成分，具有抑制血小板聚集和增加脑血流量的作用。彭宝岗等［18］的研究结果表明三七总皂甙阻断效果优于维拉帕米和垂体后叶素， 且呈剂量依赖性。另采用Asadawa法在大鼠左中肝缺血模型上行体内实验， 结果也证明三七总皂甙对HIRI的减轻效果明显优于维拉帕米。梁力健等［19］发现三七总皂甙可提高HIRI模型生存率， 其在降低ALT水平、减轻肝细胞坏死以及提高SOD活性方面均优于维拉帕米。

    Caspase-3是caspase家族蛋白酶的重要成员之一。现在一般认为caspase-3是细胞凋亡过程中最主要的终末剪切酶，也是细胞毒性T细胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）其杀伤机制的重要组成部分。李远明等［20］利用大鼠原位肝移植模型研究证实，在供肝再灌注后6 h时肝细胞凋亡最明显，该时点的凋亡指数明显高于其他时点。结果显示，供肝再灌注后早期（2 h）caspase-3和肝组织肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）的表达高于后期（24 h）；供肝再灌注后6 h转氨酶最高。这说明肝细胞凋亡在移植后再灌注早期即可发生，并可能参与肝移植后缺血再灌注早期损伤过程，caspase-3和TNF-α是促进细胞凋亡基因，移植肝组织中两者的表达与肝细胞凋亡正相关关系。此实验在切取供肝前用PNS预处理，通过其拮抗钙离子、减少自由基的产生、保护线粒体等途径达到阻遏或延迟细胞凋亡的作用。

    3.1.4  灯盏花素（Breviscapine）

    灯盏花素是从菊科短亭飞蓬灯盏花中提取分离的黄酮类有效成分，具有活血化瘀、消炎止痛等功效。许多研究表明，灯盏花素对重要器官的缺血再灌注损伤有保护作用［21］。灯盏花素可通过调节Ca2+内流抑制Ca2+超载，减少自由基［22］，阻止细胞凋亡，减轻脑缺血再灌注所致的神经损伤。史小琴等［23］通过在HIRI模型上应用灯盏花素的实验表明，灯盏花素能通过抑制OFR的生成，减少OFR， 并提高肝缺血再灌后SOD 活性，对HIRI起良好的抗脂质过氧化作用。同样是史小琴等［24］研究表明，使用灯盏花素保护家兔HIRI后，SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase， GSH-Px)活性显著升高，MDA水平下降，肝细胞病变程度明显减轻，且减轻程度具有一定的剂量依赖关系。

    3.1.5  银杏叶及银杏提取物   

    银杏叶主要成分为银杏黄酮，具有敛肺平喘，活血止痛功效，现主要应用于肺虚咳喘，以及许多心脑血管疾病。银杏提取物（ginkgo biloba extract， EGb）的主要有效成分为黄酮类和内酯类化合物，具有广泛的药理作用，大量研究已证实EGb具有多价的药理作用。 威玛舒培博士在数以千次银杏叶提炼过程中发现第761次试验提取物所含EGb纯度最高、药效最佳，命名为EGb761。［25 ］班润武等［26］采用肝热缺血再灌注动物模型的实验证实，缺血再灌注3 h时凋亡最明显，与不同时间组间肝、肾、肺、小肠凋亡指数相比有显著性差异，而且以上四器官的形态、功能改变与细胞凋亡情况具有一致性。说明细胞凋亡可能是缺血再灌注后多器官损伤的重要机制之一，EGb761可能是通过阻止细胞凋亡途径而发挥对多器官的保护作用。张建华等［27］对豚鼠和SD大鼠非协调性异种肝移植缺血再灌注模型移植前给予金纳多(第4代银杏叶提取制剂)，发现移植后供肝灌注充分、均匀，肝灌注障碍有所改善；超微结构观察显示肝细胞肿胀减轻，窦状隙血小板减少，内皮细胞较完整，表明金纳多对异种肝移植缺血再灌注损伤有保护作用。

    景生虹等［28］通过在大鼠自体原位肝移植模型上应用银杏内酯（Ginkgolide，G），观察G对大鼠移植HIRI的保护作用。结果显示在移植肝PV复流5min、30min、120min时血清中的NO水平显著升高，酶学指标及肝细胞内超微结构变化较模型组有显著改善，说明G对大鼠移植HIRI有显著的保护作用，并推测这种作用可能由NO介导。另外本实验G组在肝移植PV复流2 h后肝组织ATP含量较模型组显著增高，而MDA含量较模型组显著降低，进一步证实了其对线粒体的保护作用和对自由基的清除作用。而这一结论恰好被“G所含的萜内酯A和B能降低线粒体对氧需求的敏感性”［29］所解释，即在缺血缺氧条件下，仍能通过维持线粒体的呼吸功能而发挥保护肝细胞的缺血再灌注损伤作用。

    周杰斌等［30］利用EGB对大鼠缺血再灌注原位肝移植模型进行预处理，发现HIRI时TNF-α和白细胞介素1（Interleukin-1 ，IL-1）含量明显升高，伴肝脏酶学指标增高，尤以NS再灌注组显著，但使用EGB后，实验大鼠肝脏血清酶学指标水平、肝形态学异常变化及肝组织TNF-α、IL-1活性水平均显著低于NS再灌注组，表明银杏叶提取物对缺血再灌注损伤有积极的防护作用，其机制可能是通过抑制 KC激活来减少KC释放炎性细胞因子，降低肝组织TNF-α和IL-1水平，减少OFR产生及减轻脂质过氧化反应。

    3.1.6  活血化瘀注射液Ⅰ号（HHI-Ⅰ）

    HHI-Ⅰ的有效成分为杏仁提取物，具有很强的活血化瘀作用。已有研究［31］表明，用HHI-Ⅰ能改善脏器炎症和缺血再灌注损伤时的微循环。微循环的改善可对造模动物起到保护作用。毕旭东等［32］利用大鼠部分肝缺血模型研究了HHI-Ⅰ预处理与缺血预处理对大鼠HIRI的保护作用，结果显示HHI-Ⅰ可能通过改善肝脏微循环而改善大鼠机体之缺氧状态，从而从源头上减轻了HIRI。另外，还推断HHI-Ⅰ能通过抑制TNF-α等细胞因子和细胞黏附分子的转录表达，减轻肝组织中中性粒细胞的浸润，从而减轻缺血再灌注对大鼠肝脏的损害。同样是毕旭东等［33］发现HHI-Ⅰ的保护机制可能在于改善肝脏微循环,减轻组织缺氧状态,并通过抑制TNF-α和细胞间黏附分子（1intercellular adhesion mole-cule-1，ICAM-1）等细胞因子和细胞黏附分子的转录表达,减轻肝组织中中性粒细胞的浸润。

    3.1.7  红花注射液

    红花是葡科植物红花的花朵，其化学成分主要为红花黄素、红花苷和总酮类化合物等，其中查尔酮类化合物红花黄素为红花的主要有效成分，红花黄素是红花中具有较强药理活性的一组生物碱。现代药研究表明红花有多种药理作用。刘歆春［34］的研究将缺血再灌注组、红花注射液预处理+缺血再灌注组分别与空白对照组比较，结果提示：在第一时间点，体内此时已经有一定量的损伤性细胞因子TNF-α及自由基生成并对肝组织造成损伤；在第二时间点，缺血再灌注组、红花注射液预处理+缺血再灌注组两组ALT、AST的变化程度均进一步加大，TNF-α浓度与MDA活性更加增高，而SOD活性下降，同时，肝功能亦同步上升，并与TNF-α浓度、MDA活性呈高度相关，与SOD活性呈负相关。此时，肝组织超微结显示，肝窦淤血，炎性细胞浸润，肝细胞呈点、片状坏死(两组均P<0.05)。这表明灌注期细胞因子及自由基释放急剧增多，抗氧化系统继续被抑制，肝细胞损伤程度进一步加重。结果提示，红花注射液在肝缺血再灌注损伤中能显著减少TNF-α和自由基的生成，加速自由基的清除，对HIRI产生明显的保护作用。

    3.2  补虚药

    3.2.1  参附注射液

    参附注射液是一种具有抗氧化作用的中成药，其有益气温阳功效，可以提高SOD活性并减少MDA含量，使组织清除OFR的能力增强［35］。Na +- K+ - ATPase和Ca2 + - Mg2 + - ATPase是反映细胞能量代谢和建立跨膜的离子梯度与维持细胞内外这些离子平衡的两个重要的蛋白酶，它们在生理条件下又称依赖ATP的膜结合蛋白酶。肝脏缺血再灌注后两者的活性降低，热缺血时降低更为显著，且与肝细胞死亡的方式相关［36］。彭松林等［37］研究发现参附注射液可通过改善两酶的活性防护大鼠HIRI，同时证实参附注射液可以提高肝缺血再灌注后组织中Na + - K+ - ATPase、Ca2 + - Mg2 + - ATPase以及SOD的活性，说明缺血再灌注后Na + - K+ - ATPase和Ca2 + - Mg2 + - ATPase活性的改善可能是参附注射液提高SOD活性、抗OFR的结果。顾玺等［38］的实验结果显示， 肝缺血15min ， 再灌注1 、3 h后， 参附注射液组肝组织中Na + - K + - ATP 酶、Ca2 +- Mg2 + - ATP酶水平显著高于NS 组( P < 0.05) 。说明参附注射液对大鼠HIRI早期具有保护作用。参附注射液对ATP 酶的保护机制可能与其有效成分人参皂苷具有增加抗氧化酶的活性、清除OFR、抑制细胞脂质过氧化的作用有关。本研究显示再灌注24h 后两组间以上指标均无显著性差异， 表明在大鼠HIRI 晚期参附注射液保护作用不明显。

    3.2.2  黄芪注射液

    黄芪属补虚类之补气药，具有补气升阳，益卫固表，利水消肿，托毒排脓及敛疮生肌之功效。其注射液也具有补中益气升阳之功效，对缺血再灌注造成的脏器损伤具有保护作用。程梦琳等［39］利用动物模型观察了黄芪注射液对肠缺血再灌注肝损伤后大鼠肝组织NO和SOD含量变化，发现不同剂量的黄芪注射液能明显改善肠缺血再灌注损伤大鼠血清、肝组织的NO含量和SOD活性，且大剂量的逆转效应更强，表明黄芪对大鼠肠缺血再灌注后肝损伤有保护作用。其机制可能与单味黄芪具有抗OFR作用和在本实验中提高SOD活性及降低NO含量等作用有关。

    3.2.3  加味生脉散

    加味生脉散（在中药生脉散基础上加入黄芪、柴胡）中的人参、黄芪、五味子可提高体内铜、锌元素含量，增强抗自由基能力，其中的柴胡有扩血管和作钙通道阻滞剂的作用。方中生脉散具有益气生津，敛阴生脉的作用，黄芪补气生阳，益气固表；当归、芍药、百合补血养阴安神；丹参、郁金、川芎、葛根活血化瘀；檀香宽胸理气止痛。全方具有益气养阴、活血化瘀、宽胸安神的作用。窦科峰等［40］观察加味生脉散对急性肝缺血损伤的保护作用实验发现，随着肝缺血再灌注时间的延长， 肝组织内MDA和血中ALT含量逐渐升高， 而SOD活性及铜、锌含量逐渐下降， 但术前应用加味生脉散， 则显著地提高SOD活性和铜、锌含量， 降低肝组织及血中MDA、ALT含量， 减少肝细胞变性、坏死的程度和范围，提示加味生脉散对HIRI有显著的保护作用。

    3.3  祛风湿药

    3.3.1  海风藤酮

    海风藤属祛风湿散风热药，具有祛风除湿，通经活络之功效。海风藤酮（kadsurenone）从中草药海风藤中提取，是目前国内外公认的血小板激活因子(platelet-activating factor， PAF)拮抗剂，其对大鼠脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用［41］。史留斌等［42］做了海风藤酮对大鼠肝脏局部缺血再灌注损伤的保护作用实验，结果显示，HIRI时肝组织PAF含量增高，损伤随再灌注时间的延长而加重，而海风藤酮可以拮抗损伤过程中PAF增高所致的药理作用，减轻肝脏脂质过氧化程度，改善肝功能，减轻肝脏病变程度。

    3.3.2  汉防己乙素

    汉防己属祛风湿清热药，具祛风湿、止痛之功效，更宜利水退肿。汉防己乙素（demethyl-tetrandrine，d-Tet）与粉防己碱均为防己科千金藤属植物粉防己块根的有效成分。已有报道认为粉防己碱具有抗炎、抗纤维化、抗氧化及免疫调节作用，还可作为一种非特异性钙离子拮抗剂，对心、脑、肝等器官的缺血再灌注损伤产生保护作用［43,44］。刘正等［45］用汉防己乙素对大鼠B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2， bcl-2)和Bax蛋白在肝缺血再灌注时表达的影响进行了研究，结果发现，Bax表达在缺血再灌注组较生理盐水对照组和d-Tet组略有升高，其病理损伤也明显减轻，表明d-Tet可以减少Bax表达，增加Bcl-2表达。现代生物学已证明，促进凋亡基因bax具有孔形成能力，并能诱导细胞色素C的释放，激活caspase-9，启动凋亡级联反应。抑制凋亡基因Bcl-2有能抑制Bax诱导细胞色素C的释放的作用，从而阻止细胞凋亡。结合以往研究，d-Tet减轻HIRI的可能机制为：清除OFR；阻断钙离子通道；调节细胞因子和炎性介质的产生和释放；调节相关凋亡基因的表达。

    3.4  利水渗湿药

    川西樟牙菜俗称藏茵陈，属龙胆科樟牙菜属植物。王芳等［46］用大鼠肝缺血再灌注模型观察了藏茵陈对其血清中NO含量及肝细胞组织学的影响。结果显示，用藏茵陈灌胃7 d，缺血再灌注45 min大鼠血清NO含量明显高于灌胃前，肝细胞形态学异常变化减轻，血管扩张充血，表明藏茵陈对HIRI有明显的保护作用。其保护作用机制可能为藏茵陈可诱导肝细胞、血管内皮细胞释放NO，使血管扩张，改善微循环，保证了再灌后肝脏的血供和营养物质的供给，从而对肝脏的血液动力学形态、功能、代谢起到调节和保护作用。

    另外，利水渗湿药虎杖内含多酚类化合物白藜芦醇（resveratrol， RES）。已有对RES生物学功能的研究提示，其对缺血再灌注导致的组织损伤具有潜在保护作用。孙水平等［47］通过对雄性SD大鼠HIRI模型进行白藜芦醇处理，结果提示，RES能明显促进肝功能恢复，改善肝脏显微结构，对成年大鼠肝脏的缺血再灌注损伤有良好的保护作用。

    3.5 其他类型中药

    3.5.1  葛根素（Puerarin）和葛根异黄酮

    葛根为豆科植物野葛的干燥根，具有解肌退热，透发麻疹功效，其主要成分为葛根异黄酮类化合物（Pueraria Lobata Isoflavones， PLIs），而葛根素是从中药葛根中提取的一种异黄酮单体，具有改善组织微循环以及抗OFR、抗氧化等药理作用［48］。

    李涛等［49］的实验结果显示，Puerarin组反映肝损害的指标ALT、MDA、内皮素I (endothelln-I， ET-I)和细胞总钙均较对照组明显下降；而NO、SOD等保护性指标则明显升高。在光镜下各病理改变均较对照组明显减轻，并可见肝细胞的再生，以上结果从功能和形态两方面均充分表明Puerarin预处理能明显减轻HIRI。

    许冬武等［50］通过观察葛根素注射液对家兔HIRI的防治作用后发现，应用葛根素后，血浆黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase ，XO)活性及MDA含量显著下降，SOD、ALT活性均显著增高，电镜下肝细胞肿胀明显减轻，线粒体大部分恢复正常，表明葛根素能够减轻OFR介导的脂质过氧化反应对肝脏的损害，增强机体的抗氧化应激能力。葛根素还能阻止Na+的内流，舒张微动脉，改善微循环障碍。

    3.5.2  小柴胡汤

    小柴胡汤出自于《伤寒论》,有“寒热并用,攻补兼施,和解少阳疏利三焦、调达升降运行气血”(《医宗金鉴》)的功效。研究证实,全方中含有大量的黄芩素、人参皂甙等成分,可减少细胞内游离钙浓度,防止“钙超载”发生，且两者都是良好OFR清除剂［５１］。张征等［52］研究表明HIRI能促进肝内胆管上皮细胞凋亡的发生，小柴胡汤预处理具有对HIRI大鼠肝内胆管上皮细胞的保护作用（即可减轻肝内胆管上皮细胞损伤）。

    4  结语

    综上所述，不管是某味中药的有效成分，还是中药复方中药， 都对HIRI具有一定的防护作用。在预处理时，特别强调应用保护药物应在再灌注前或同时，若在再灌注后应用将收不到有效的防护效果。从本文所复习的可以发现，在预处理动物模型HIRI所涉及的中药中，以活血化瘀药居多，其机制可能是：HIRI相当于中医学中的因瘀生热、瘀热互结、因瘀致郁、肝气郁结、肝胆疏泄不利的病理状态。故中药防治HIRI以活血化瘀药为主，有其针对性，小柴胡汤是针对病机发挥疏肝解郁、泄热散瘀之功效,使肝胆气机畅利以抗御不良刺激损害之典型复方，达到了辨证论治“治病究根”的靶向效应。中药是从多水平、多环节、多靶点对缺血或再灌造成损伤的肝脏进行适应性保护，可谓一种复合性调节。不管以上中药如何循其径而奏其效，我们还是不难发现它们至少是通过以下若干途径发挥对HIRI的防治作用：清除OFR；减轻钙超载；提高内源性SOD活性，减轻脂质过氧化反应；稳定细胞膜，保护细胞器，阻遏或延迟细胞调亡；增加内皮细胞合成/释放NO介导对HIRI的保护作用，并减少ET-Ⅰ的合成/释放；降低血清ALT、AST、TB、MDA等含量；抑制血小板聚集、黏附和活化；干预炎性细胞因子；提高某些酶活性以介导保护作用；保护线粒体，改善能量代谢等。

    当前的研究工作呈现以下特点：（1）动物实验研究居多， 而临床研究较少；（2）单味药及其有效成分研究较多， 中药复方研究较少；（3）应用现代医学技术进行研究较多， 而在纯中医药理论指导下探讨HIRI的研究缺乏；（4）中成药的预处理尚不能完全使受损肝组织和细胞恢复至初始之完好状态。

    对HIRI具有保护作用的中草药主要成分，是否存在中草药预处理的作用点，如何鉴定、纯化其有效成分，如何有效分离其化学单体及提高其生物活性等，都是需要深入研究的问题。今后若能结合现代医学技术，在中医药理论指导下， 寻找出防治HIRI的理想切入点， 还将大幅提高中药对HIRI的防护效果。

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